农杆菌YEP肉汤(增菌)
储存条件:常温保存,3 年有效。
产品说明:
YEP 培养基(Yeast Extract Peptone Broth Medium)常用于农杆菌的增菌培养。酵母浸粉和蛋白胨提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠可维持均衡的渗透压。
成分组成:(g/L)
配制方法(仅供参考):
1. 称取适量培养基,加蒸馏水至 1 L,搅拌均匀,调 pH 值至 7.0±0.2。
2. 121 ℃高温灭菌 15 min 或 115 ℃高温灭菌 20 min。
3. 固体培养基冷却到 50-60 ℃,加入抗生素,倾倒平皿,
4 ℃避光保存备用。
农杆菌感受态制备(仅供参考):
1. 活化:将农杆菌菌种(-80 ℃)室温解冻,划线至 YEP平板上(50 mg/L Rif)28 ℃过夜活化。
2. 小摇:挑取单克隆接种于 5 mL 液体 YEP 培养基,28 ℃,200 rpm 培养过夜。
3. 大摇:取 2 mL 过夜菌液接种于 50 mL 液体 YEP 培养基中,28 ℃生长至 OD600约等于 0.5 左右。
4. 离心:采用 1.5 mL 离心管,4 ℃,4500 rpm 离心 10 min,弃上清,收集菌体。
5. 取现配的 0.1 mol/L 的 CaCl2溶液 400 μL 溶解上述菌块,冰上静置 30 min;
6. 再次离心,用 100 μL 的 CaCl2溶液溶解上述菌块,即为农杆菌感受态。
注意事项:
1. 注意无菌操作,避免微生物污染。
2. 根据菌株生长特性,可适当调整 pH 值。
3. 该培养基仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其它用途。
4. 称量时注意粉尘,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。
5. 干粉培养基使用后立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块。未开封产品保质期三年,开封后根据存放条件的不同保质时间存在一定的差异。
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!